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PCS-i220A/B柱后衍生仪在15药典测定中利用

丈量步骤:

 更新功夫:2017-09-13 点击量:3938

丈量步骤:

本法系用液相色谱法(公例0512)测定药材、饮片及造剂中的毒素(以毒素B1、毒素B2、毒素G1,毒素G2总量计),除还有划定表,按下列步骤测定。


液相色谱仪器组成:
等度液相色谱仪(高压输液泵一台、荧光检测器一台、柱温箱一台、进样器1件、色谱柱一根等)
柱后衍生仪:PCS-i220A/B

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色谱柱:PC C18 4.6×150mm,5μm
高快离心理:离心快率4000转/分钟以上
溶剂过滤器
超声波洗濯器
固相萃取仪
免疫亲和柱
分析天平:万分之一
均质器(高快搅拌器):搅拌快率大于11000转/分钟

试剂
甲醇:色谱纯
乙腈:色谱纯
0.05%的碘溶液
超纯水
毒素B1.毒素B2、毒素G1、毒素G2对照品

色谱前提
检测器:荧光检测器
色谱柱:PC C18 4.6×150mm,5μm
流动相:甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)
流快:1.0ml/min
柱温:40℃
衍生溶液:0.05%的碘溶液(取碘0.5g,参与甲醇100ml使溶化,用水稀释至1000ml造成)
衍生化泵流快:0.2ml/min
衍生化温度:70℃
引发波长λex=360nm(或365nm),发射波长λem=450nm

混合对照品溶液的造备
精密量取毒素混合尺度品(毒素B1、毒素B2、毒素G1、毒素G2标示浓度别离为1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/m1)0.5ml,置10ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为储蓄液。精密量取储蓄液1ml,置25ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,即得。 

供试品溶液的造备
取供试品粉末约15g(过二号筛),精密称定,参与氯化钠3g,置于均质瓶中,精密参与70%甲醇溶液75ml,高快搅拌2分钟(搅拌快率大于11000转/分钟),离心5分钟(离心快率4000转/分钟),精密量取上清液15ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,量取续滤液20.0ml,通过免疫亲合柱,流快每分钟3ml,用水20ml洗脱,洗脱液弃去,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用适量甲醇洗脱,网络洗脱液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。 

测定步骤
精密汲取上述混合对照品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定峰面积。另精密汲取上述供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定峰面积,推算出zui终了局。
毒素B1、B2、G1、G2对照品色谱图:

 

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以上是使用PCS-i220A/B柱后衍生仪 了局基线安稳 峰型窄 检出限低 检测正确 *步骤要求。

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